CCHFV'ye Karşı NP-ΨmRNA Aşı Adayının Hücresel ve Hümoral İmmün Yanıtları: Fare Modelleri ile Değerlendirme

Abstract

Kırım-Kongo Kanamalı Ateşi Virüsü (CCHFV), yüksek ölüm oranları, insanlar arasında bulaşma potansiyeli, iklim değişikliği ile yayılan endemik bölgeler nedeniyle küresel halk sağlığı için ciddi bir tehdit oluşturmaktadır. Dünya Sağlık Örgütü (WHO) tarafından öncelikli patojenler listesine dahil edilmiştir. Bu nedenle, özellikle aşılar gibi koruyucu önlemlerin geliştirilmesi ve değerlendirilmesi, Kırım-Kongo Kanamalı Ateşi (CCHF) \"nin zararlı etkilerini azaltmak için kritik önem taşımaktadır. Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) pandemisinde mRNA temelli aşıların başarısından ilham alarak, bu çalışmada CCHFV\" nin nükleokapsid proteinini (NP) ifade bir in vitro transkript (IVT) pseudouridine nükleosid modifiyeli (Ψ) messenger ribonükleik asit (mRNA) aşı adayı geliştirdik ve bu aşının preklinik immünolojik karakterizasyonunu gerçekleştirdik. İmmunocompetent Bagg Albino / C suşu (BALB/c) farelerde yapılan in vivo çalışmalarda IVT NP- ΨmRNA\" nın FDA onaylı Polylactic-co-Glycolic Acid (PLGA) nanopartiküller ile formüle veya sadece naked IVT NP- ΨmRNA\" nın verildiği aşılama sonrası fare serumlarında NP\" ye karşı güçlü Immunoglobulin (Ig)M ve IgG yanıtları gözlendi. Hücresel bağışıklık yanıtlarını değerlendirmek için, aşılanmış farelerin dalak ve lenf nodlarından elde edilen splenosit ve lenfositler ile lenfoproliferasyon Assay (LPA) deneyleri yapıldı ve elde edilen hücresel total RNA\"lar üzerinden sitokin profilleme çalışmaları gerçekleştirildi. Bu sonuçlar, güçlü hücresel yanıtların takibini sağlamıştır. MAR1-5A3 anti-mouse IFNAR-1 blocking antikorları ile İmmün baskılanmış (IS) C57BL/6 farelerde yapılan challenge deneyleri sırasında hücresel ve hümoral immünolojik yanıtlar da tespit edildi. Ayrıca, challenge öncesi / sonrası antikor yanıtları, afinite ve avidite ölçümleri arasında uyum gözlendi. Bu uyum dengeli elde ettiğimiz T-helper (Th)1 ve Th2 yanıtı ile benzerdir. Sonuç olarak bu çalışma, IVT NP- ΨmRNA aşı adayının preklinik modelde güçlü ve etkili immunolojik yanıtlar geliştirdiğini göstererek, CCHFV\"ye karşı ileriye dönük aşı geliştirme çalışmaları için umut verici sonuç sağlamaktadır. Aşımızın etkinliği ve alınan immunolojik yanıt sonuçları, klinik çalışmalarda test edilmesini desteklemektedir.